PCR 실험에서 시약 휘발에 대한 자세한 설명

PCR 실험에서 시약 휘발에 대한 자세한 설명.

PCR 실험에서, 반응 시스템을 추가 한 후, 우리는 뚜껑을 조심스럽게 덮고 시약 휘발을 피하기 위해 뚜껑이 닫혔다는 것을 반복적으로 확인합니다. 그러나 때때로 우리는 또한 의심의 여지가 있습니다. 우리는 뚜껑이 밀접하게 닫혀 있음을 확인했지만 실험이 완료된 후에는 시약이 여전히 증발합니다. 이유는 무엇입니까?

실제로, 시약 휘발은 PCR 실험에서 가장 일반적인 문제 중 하나이며, 시약 휘발에 영향을 미치는 많은 요인이 있습니다.

증발은 PCR 실험 중에, 반응 용액이 고온에서 증발한 다음 병 벽 또는 상단 덮개에서 응축하여 물 안개 또는 물방울을 형성하거나 병 캡 또는 필름의 공기 갭에서 직접 오버플로되는 것을 나타냅니다. 반응 용액의 농도의 변화에서. 변화, 반응 용액의 양이 감소하고 일부는 건조로 증발하여 유효하지 않은 실험을 초래했습니다.

1. 뜨거운 뚜껑 압력, 온도

PCR 실험에서, 우리는 보통 시약 증기의 응축을 방지하기 위해 뚜껑을 가열합니다. 가열 된 뚜껑의 온도는 일반적으로 증기의 응축을 방지하기 위해 반응 용액의 온도보다 높다.

열 사이클러 가열 뚜껑은 대략적으로 조정할 수없는 가열 뚜껑, 조절 가능한 가열 뚜껑, 적응 형 난방 뚜껑 및 자동 가열 뚜껑으로 나눌 수 있습니다. 조절 가능한 가열 뚜껑에는 손가락 압축 기능이 있습니다. 단단히 조이지 않으면 시약이 증발합니다. 가열 된 뚜껑의 압력을 증가시켜 가장자리 증발을 최소화 할 수 있습니다. 때로는 과도하게 튜브를 꼬집어 손잡이를 비틀 수 있습니다. 정상적인 상황에서 전기 스마트 가열 커버는 서로 다른 높이의 소모품을 자동으로 감지하고 소모품을 자동으로 압축 할 수 있으며 압력이 균일하고 일정하여 시약 증발 및 수동 오류를 줄이고 실험 정확도 및 반복성을 향상시킵니다.

2. 소모품의 변형

증기 누출의 경우 대부분의 사람들은 뜨거운 뚜껑 압력으로 충분하지 않다고 생각합니다. 뜨거운 뚜껑의 압력은 매우 중요하지만 그것은 단 하나의 측면 일뿐입니다. 실제로 소모품도 매우 중요합니다.

PCR 오리피스 플레이트는 일반적으로 플라스틱 재료로 만들어져 가열 된 후에 크게 확장되고 변형됩니다. PCR 오리피스 플레이트를 배치하는 데 사용되는 PCR 금속 염기의 열 팽창 속도는 매우 낮으며, PCR 오리피스 플레이트는 열 팽창 후 평면을 따라 정상적으로 팽창 할 수 없습니다. 부풀어 오는 상태는 상부 열 커버가 PCR 오리피스 플레이트의 표면에 완전히 접촉 할 수 없게하여 온도와 압력이 고르지 않아 PCR 오리피스 플레이트의 가장자리에서 시약 증발을 유발하고 PCR 검출 효과에 영향을 미칩니다.

3. 소모품은 단단히 밀봉되어 있지 않습니다

열 뚜껑과 소모품의 압박감이 PCR 튜브 캡이 단단히 닫히고 PCR 웰 플레이트의 품질이 고르지 않다는 것을 의미하지는 않습니다. 고품질 소모품, 노즐 표면 및 덮개 표면은 매끄럽고 상자 덮개 뒤의 씰이 양호하며 새는 것은 쉽지 않습니다. 열등한 소모품에는 고르지 않은 스파우트와 방사선이있어 누출을 쉽게 유발하거나 건조시킬 수 있습니다.

따라서 PCR 실험에서 고품질 및 적합한 소모품을 선택하십시오. 동시에, 반응 시스템을 확장하여 반응에 대한 시스템 증발의 영향을 최소화 할 수있다.